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　　三葉青為葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤(TetrastigmaHemsleyanum. Diels et Gilg)的塊根或全草,主要分布于長江以南各地,全草含有槲皮素山柰酚、山秦酚-3-新橙皮糖苷等多種黃類化合物,具有清熱解毒、酒血風的功效,民間用于治療黃疸及急慢性肝炎有較好的療效。

　　本研究旨在觀察三葉青的功效對大鼠慢性肝損傷的保護作用。

　　1、實驗材料

　　1.1動物

　　sD大鼠,體質量70-90gn雌雄各半,由上海「斯萊克實驗動物責任有限公司提供,生產許可證:SCXK(滬)20003京中醫藥大學,實驗動物使用許可證:SCXK(蘇)200053

　　1.2藥品與試劑

　　三葉青,丙氨酸氨基傳移酶(ALT)試劑盒Vnitech sciences INC,U.S.A.批號：103302 ;天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)試劑盒, Vnitech sciencesNC,U.S.A,批號101024，白蛋白(ALB)試劑盒Vnitech sciencesNC,U.S.A.,批號:101024;總蛋白(TP)試劑盒, Vnitech sciences INC,,U..A,批號:101024;透明質酸(HA)試劑盒(美國 PowerTech公司)批號號:020705;粘連蛋白(amin,LN)試劑盒,上海海研醫學生物技術中心,批號:200512，四氯化碳(CCL4),化學純,上海長江化工廠,批號950205，橄欖油，化學純，,南京化學試劑廠,批號960806,齊墩果酸粉,貴陽制藥廠,批號:050406用前以2%吐溫-80配置成混懸液。

　　1.3儀器

　　yital-200,全自動生化分析儀,荷蘭威圖科學儀器公司;奧林巴斯顯微鏡,日本。

　　2、方法

　　2.1分組給藥

　　取健康SD大鼠96只雌雄各半,隨機分成6組每組16只。6組分為:①正常組:給予等容積蒸餾水;②模型組:給予等容積蒸餾水;③三葉青低劑量組,給予三葉青1g/kg體質量;④三葉青中劑量組,給予三葉青2g/kg體質量:⑤三葉青高劑量組,給予三葉青4g/kg體質量;⑥陽性對照組,給予齊墩果酸80mg/kg體質量。各組均灌胃給藥,每日給藥1次,連續給藥8周。

　　2.2大鼠造模及觀察指標

　　于實驗d1,除正常組外,其余各組均皮下注射30%CCL4橄欖油,以后每隔3-4d皮下注射CCL40.3mL/kg體質量,連續注射3個月。各組均于造模第個月末開始給藥,每日1次,連續給藥月。于第3個月未,各組動物眼眶取血,進行各項指標檢測。

　　3、結果

　　3.1對C4所致慢性肝損傷大鼠存活率的影響大鼠經CL4造成肝損傷后3個月內,各造模組動物均出現不同度的死亡。三葉青3個劑量組大鼠存活率均高于模型組,其中三葉青高劑量組大鼠存活率與模型組相比,有顯著性差異,提示三葉背可以提高造模大鼠的存活率。結果見表1。

　　3.2對大鼠血清ALT、Asr、T-Bi水平的影響

　　大鼠經CCL4造成慢性肝損傷后,肝功能出現明顯的異常,模型組大鼠血清AST、ALT及TB水平均高于正常組,與正常組相比,均有顯著性差異。三葉青3個劑星均能明顯降低造模大鼠的異常升高的血清 AST ALT和TB水平,其中商中劑量組大鼠血清As、,AT及TB1;,與模型組相比有顯著性差異。表明三葉青具有一定的保肝降酶作用,結果見表2。

　　3.3對CCL4白蛋白含量、白蛋白/球蛋白比例的影響

　　大鼠經CCL4造成慢性肝損傷后,血清總蛋白白蛋白含量和白蛋白、球蛋白比例明顯下降。三葉青3個劑量組大鼠血清總蛋白和白蛋白均高于模型組,與模型組相比,均有顯著性差異。三葉青高劑量組大鼠血清白蛋白/球蛋白高于模型組,與模型組相比有顯著性差異。表明三葉青可阻止造模大鼠血清總蛋白白蛋白的含量下降以及糾正造模動物血清白蛋白/球蛋白比例失調,結果見表3。

　　3.4對血清HA、IN水平的影響

　　模型組大鼠血清HA、LN含量明顯升高。高、中劑量組大鼠血清HA和3個劑量組血清IN含量均低于模型組,與模型組相比,有顯著差異,表明三葉青具有降低造模大鼠血清HA水平作用。結果見表4

　　4、討論

　　1.1 CCL4對肝毒性損傷主要是由于，經肝細胞微粒體細胞色素代謝裂解成三氯甲基自由基(CCL3),CCL3-可進一步氧化反應形成具有更強活性的基團,從而產生脂質過氧化作用,破壞肝細胞的膜性結構,此損傷不斷反復,繼之有肝細胞壞死、炎癥激活肝臟內kper細胞、內皮細胞等,使其釋放各種細胞因子,細胞因子進一步激活靜息狀態的星狀細胞使之轉化為肌成纖維樣細胞(MBLC),MBC過度增殖,同時大量合成各種細胞外基質(ECM),過度沉積而導致肝纖維化。本實驗結果顯示CC所致慢性肝損傷時,大鼠血清AIT、 AST. HA, IN水平均升高,TP、ALB水平和AG均降低。

　　1.2 本研究結果表明,三葉青的功效可降低造模大鼠血清ALT、AST、HA、IN及TB水平,抑制造模動物血清TP、AIB水平及AG下降和提高大鼠存活率,提示三葉青的功效具有良好的保肝降酶作用。HA是由間質細胞合成的一種大分子葡萄胺多糖,是結締組織基質的主要成分,是反映內皮細胞功能和肝硬化程度較為敏感的指標。其血清測量值改變與肝纖維化正相關,反映已生成的纖維化程度,即肝病變程度。是細胞間質的成分之肝、纖維化、肝內炎細胞浸潤及肝細胞壞死、變性程度呈正相關,亦與食管靜脈曲張呈顯著正相關。本研究結果表明三葉青可顯著抑制HA、IN的異常增高,提示三葉青的功效具有良好的抗肝纖維化的作用。

　　由以上三葉青的功效針對慢性肝損傷的實驗研究得出，三葉青的功效針對慢性肝損傷有效，三葉青的功效針對甲肝，乙肝，丙肝患者有很好的保肝降酶作用，對肝有良好的抗肝纖維化作用，三葉青的功效具有養肝保肝的作用。